以PCR產(chǎn)物為模板，只要引物，體系對，怎么P怎么出你的模板就是PCR產(chǎn)物，濃度再低也沒事，稀釋100倍沒問題沒什么要注意的；RNA分子怎么能作為PCR模板呢PCR的酶是DNA聚合酶，需要用DNA為模板因此需要mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，再以cDNA為模板才能進(jìn)行PCR反應(yīng)。

RNA做模板就是所謂的反向PCR了耐高溫不是聚合酶的通性，聚合酶一般都不耐高溫，所以雖然PCR的思想早就有了，但是因為沒有耐高溫的聚合酶所以才無法付諸實踐，直到后來從水生棲熱菌中發(fā)現(xiàn)了Taq才使得PCR被廣泛使用；1引物和模板在加之前離不離心 跟以后有沒有條帶沒有關(guān)系PCR沒有條帶一般是因為各物質(zhì)之間的比例或者退火溫度不合適，你需要調(diào)整和優(yōu)化每換一種試劑都要重新優(yōu)化PCR條件2把水bufferDntpmg離子做一個mixture。

你看得那個糊涂蛋的protocol，其實做實驗沒有那么刻意，能做出結(jié)果就是最好的了當(dāng)然也得注意細(xì)節(jié)；PCR分開擴(kuò)增，2者或多者片段大于20bp可以混在一起 3730毛細(xì)管電泳可以區(qū)分出來。

首先，如果你的引物不存在相互的干擾，那么你可以試著放在一個體系里面做實驗其次，引物設(shè)計按照標(biāo)準(zhǔn)的方法就可以 最后，實在是要用電泳的方法，并且你的片段大小相差較大的情況下可以使用瓊脂糖，什么情況下用聚丙烯酰胺凝膠；在PCR反應(yīng)中，除了引物和模板，其他的試劑是完全一樣的，為了防止在加樣的過程中，造成其他試劑的污染，一定是把別的都取出來以后，再加引物，再加模板這樣其他人，或者其他樣品再用這些試劑的時候，相互污染的可能性小。

pcr技術(shù)的模板和原料是什么

1、PCR合成的時候當(dāng)然不只是需要引物，模板鏈也就是目的基因片段是必須的因為DNA聚合酶合成DNA時只能從一段已有的DNA片段往上加脫氧核苷酸延伸子鏈，而不能從頭合成，所以需要一段引物引物就是目的基因在5#39段的一小段序列。

2、菌落pcr和菌液pcr在原理和操作方面有什么區(qū)別 如果轉(zhuǎn)化成功的話，菌落里的菌就含有你克隆的質(zhì)粒載體了，用槍頭直接碰一下，然后作為PCR模板，就可以進(jìn)行PCR擴(kuò)增了但是菌落PCR鑒定的假陽性率其實也不低，所以建議你挑取菌落。

3、原理是提取組織或細(xì)胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用OligodT或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，而獲得目的基因或檢測基因表達(dá)該技術(shù)主要用于分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物獲取目的基因。

4、PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)。

5、你好，你要擴(kuò)增哪里，那里就是你的說的目的片段和基因本身沒有什么具體關(guān)系可以擴(kuò)增基因內(nèi)的一部分序列內(nèi)含子也好外顯子也好內(nèi)含子+外顯子也好，可以擴(kuò)增基因外的間隔序列，完全是根據(jù)實驗需要來定的。

pcr技術(shù)模板dna的作用

同學(xué)，從你問問題的情況我猜想你可能有些基本問題很含糊我試著分析一下1首先PCR是體外大量擴(kuò)增目的DNA的技術(shù)你問模板DNA是什么，這是不需要問的，你想擴(kuò)增的目的基因是什么什么就是模板你用cDNA來做PCR模板當(dāng)然是。

引物為人工合成的兩段寡核苷酸序列，一個引物與靶區(qū)域一端的一條DNA模板鏈互補(bǔ)，另一個引物與靶區(qū)域另一端的另一條DNA模板鏈互補(bǔ)，其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點，核酸聚合酶可由其3端開始合成新的核酸鏈PCR引物。

PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)Polymerase chain reaction的縮寫，它是體外酶促合成特異DNA片段的方法這一方法的要點是合成兩個分別互補(bǔ)于待擴(kuò)增DNA片段兩端的小片段引物，在含有引物待擴(kuò)增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反應(yīng)體系。